4-نیتروفنیل فسفات دی‌سدیم (pNPP) – 4-NITROPHENYL PHOSPHATE DISODIUM, HEXAHYDRATE, AR GRADE

4-نیتروفنیل فسفات دی‌سدیم (pNPP) که به صورت نمک هگزا هیدرات عرضه می‌شود، پرکاربردترین سوبسترا برای سنجش فعالیت آنزیم‌های فسفاتاز، به ویژه **آلکالین فسفاتاز (ALP)** است. این ماده پودری کریستالی سفید یا زرد کم‌رنگ است که در آب حل می‌شود و محلولی بی‌رنگ ایجاد می‌کند. مکانیسم عمل آن بسیار کارآمد است: آنزیم فسفاتاز، گروه فسفات را از مولکول pNPP جدا می‌کند و محصولی به نام “پارا-نیتروفنول” (pNP) تولید می‌کند. پارا-نیتروفنول در محیط قلیایی رنگ زرد مشخصی دارد که شدت جذب نوری آن در طول موج 405 نانومتر با فعالیت آنزیم رابطه مستقیم دارد.

کاربرد در الایزا (ELISA) و تشخیص طبی

این واکنش اساس تست‌های تشخیصی کبد و استخوان (سنجش ALP خون) در آزمایشگاه‌های تشخیص طبی است. همچنین در تکنیک الایزا، از pNPP به عنوان سوبسترا برای آنتی‌بادی‌های متصل به آنزیم آلکالین فسفاتاز استفاده می‌شود تا وجود آنتی‌ژن هدف با تغییر رنگ چاهک‌ها به زرد تایید شود. فرم هگزا هیدرات آن در اکسیر لایف خلوص بالایی دارد و حلالیت سریعی در بافرهای آزمایشگاهی (مانند دی‌اتانول‌آمین) نشان می‌دهد.

کاربردها و مصارف

• سوبسترای کروموژنیک برای سنجش فعالیت آلکالین فسفاتاز (ALP) و اسید فسفاتاز.
• معرف اصلی در تست‌های الایزا (ELISA) مبتنی بر فسفاتاز.
• آنالیزهای بیوشیمیایی و بلاتینگ پروتئین.
• سنجش فعالیت آنزیمی در بیوتکنولوژی و صنایع غذایی (تست پاستوریزاسیون شیر).

نکات ایمنی

• حساسیت نوری: پودر و محلول آن به نور حساس است (زرد می‌شود)؛ در تاریکی نگهداری شود.
• نگهداری: در یخچال (۲ تا ۸ درجه) برای پایداری طولانی‌مدت.
• محلول‌سازی: محلول آماده شده ناپایدار است و باید تازه مصرف شود.