فنول کریستال (گرید بیولوژی مولکولی) – PHENOL, CRYSTALS

فنول کریستال (Phenol) با خلوص بیولوژی مولکولی، ماده‌ای کلیدی برای استخراج و خالص‌سازی اسیدهای نوکلئیک است. این ماده به صورت کریستال‌های سفید یا صورتی کم‌رنگ (در صورت اکسیداسیون) با بوی تند و مشخص عرضه می‌شود. در تکنیک استاندارد استخراج فنول-کلروفرم، فنول به عنوان یک عامل دناتوره کننده پروتئین عمل می‌کند. مکانیسم آن بر اساس تفاوت حلالیت مولکول‌های زیستی در دو فاز آلی و آبی است؛ فنول پروتئین‌ها را دناتوره کرده و آن‌ها را به فاز آلی یا سطح مشترک (Interphase) می‌راند، در حالی که اسیدهای نوکلئیک (DNA/RNA) در فاز آبی باقی می‌مانند. pH فنول نقش تعیین‌کننده‌ای در جداسازی دارد: فنول اشباع شده با بافر Tris (pH 8.0) برای استخراج DNA استفاده می‌شود (زیرا در این pH، دی‌ان‌ای در فاز آبی می‌ماند ولی آر‌ان‌ای ممکن است هیدرولیز شود یا به فاز آلی برود)، در حالی که فنول اسیدی (pH 4-5، اشباع شده با آب) برای استخراج اختصاصی RNA به کار می‌رود (در این pH، دی‌ان‌ای به فاز آلی منتقل می‌شود).

استفاده از فنول کریستال خالص نیازمند آماده‌سازی و اشباع‌سازی دقیق با بافر است تا pH و اسمولاریته مناسب ایجاد شود. این محصول فاقد نمک‌های فلزی و نگهدارنده‌های مزاحم (مانند هیپوفسفیت) است که می‌توانند آنزیم‌های بعدی (مانند لیگاز یا پلیمراز) را مهار کنند.

کاربردها و مصارف

• استخراج و خالص‌سازی DNA ژنومی و پلاسمیدی (با فنول قلیایی).
• استخراج RNA کل (با فنول اسیدی یا تریزول).
• حذف پروتئین‌ها و آنزیم‌ها از محلول‌های اسید نوکلئیک.
• غیرفعال‌سازی آنزیم‌ها پس از واکنش‌های بیوشیمیایی.

نکات ایمنی

• سمیت شدید: فنول به سرعت از طریق پوست جذب شده و باعث سوختگی‌های شدید و بی‌درد (به دلیل آسیب عصبی) و مسمومیت سیستمیک می‌شود. استفاده از دستکش نیتریل، لباس محافظ و هود الزامی است.
• اکسیداسیون: کریستال‌های قرمز رنگ نشان‌دهنده اکسیداسیون هستند و نباید برای کارهای حساس استفاده شوند.
• نگهداری: در دمای ۲ تا ۸ درجه و دور از نور.