بافر CAPS (گرید بیولوژی مولکولی) – CAPS (3-[Cyclohexylamino]-1-Propanesulphonic Acid)

بافر CAPS یا 3-(سیکلوهگزیل‌آمینو)-1-پروپان‌سولفونیک اسید، یک بافر زویتر-یونی از دسته بافرهای گود است که برای محدوده pH قلیایی (9.7 تا 11.1) طراحی شده است. pKa بالای آن (10.4) این ماده را به یکی از بهترین گزینه‌ها برای فرآیندهای بیوشیمیایی در pH بالا تبدیل کرده است. مهم‌ترین و شناخته‌شده‌ترین کاربرد CAPS در تکنیک وسترن بلات (Western Blotting) به عنوان بافر انتقال (Transfer Buffer) است. هنگامی که پروتئین‌ها از ژل SDS-PAGE به غشای نیتروسلولز یا PVDF (به ویژه برای توالی‌ابی N-terminal) منتقل می‌شوند، استفاده از بافر CAPS به جای بافر Tris-Glycine مزایای زیادی دارد: ۱. مانع از تجمع گلیسین در غشا می‌شود که در توالی‌ابی پروتئین اختلال ایجاد می‌کند. ۲. برای انتقال پروتئین‌های با وزن مولکولی بالا (> 20 kDa) و پروتئین‌های بازی (Basic Proteins) که نقطه ایزوالکتریک بالایی دارند، بسیار کارآمدتر است.

علاوه بر وسترن بلات، CAPS در سنجش فعالیت آنزیم‌هایی که در محیط قلیایی فعال هستند (مانند آلکالین فسفاتاز) و در مطالعات فتوسنتز (کلروپلاست) استفاده می‌شود. این بافر ساختاری بسیار پایدار دارد، با فلزات دو ظرفیتی (مانند کلسیم و منیزیم) کمپلکس نمی‌دهد و در برابر هیدرولیز آنزیمی مقاوم است.

کاربردها و مصارف

• بافر انتقال (Electroblotting Buffer) در وسترن بلاتینگ (جایگزین Tris-Glycine).
• آماده‌سازی نمونه‌های پروتئینی برای توالی‌ابی (Edman degradation).
• بافرینگ واکنش‌های آنزیمی در pH قلیایی (مانند آلکالین فسفاتاز).
• تحقیقات فتوسنتز و کلروپلاست.
• کروماتوگرافی تبادل کاتیونی.

نکات ایمنی

• آماده‌سازی: برای حل شدن و تنظیم pH معمولاً نیاز به NaOH دارد.
• ایمنی: غیر سمی و ایمن است.
• نگهداری: در دمای محیط و جای خشک.