اوره (گرید بیولوژی مولکولی) – UREA

اوره (Urea) با فرمول CH4N2O، یک ترکیب آلی ساده اما با خواص قدرتمند **کائوتروپیک (Chaotropic)** است. گرید بیولوژی مولکولی این محصول (TMB 084) دارای خلوص بسیار بالا و فاقد یون‌های سیانات (که با پروتئین‌ها واکنش می‌دهند) است. در غلظت‌های بالا (6 تا 8 مولار)، اوره پیوندهای هیدروژنی و برهم‌کنش‌های هیدروفوب را در ماکرومولکول‌ها از بین می‌برد و باعث **دناتوره شدن (باز شدن)** کامل ساختار پروتئین‌ها و اسیدهای نوکلئیک می‌شود.

کاربرد اصلی آن در تهیه ژل‌های **Urea-PAGE** برای جداسازی قطعات DNA و RNA تک‌رشته‌ای (مانند پرایمرها و الیگونوکلئوتیدها) در شرایط دناتوره است؛ اوره مانع از تشکیل ساختارهای ثانویه (مانند سنجاق‌سر) در RNA می‌شود و اجازه می‌دهد مولکول‌ها فقط بر اساس طولشان جدا شوند. در تخلیص پروتئین، برای حل کردن پروتئین‌های نامحلول و “اجسام انکلوژن” (Inclusion bodies) که در باکتری‌های نوترکیب تشکیل می‌شوند، حیاتی است. پس از حل کردن، اوره به تدریج حذف می‌شود تا پروتئین دوباره فولد شود (Refolding).

کاربردها و مصارف

• تهیه ژل‌های پلی‌اکریل‌آمید دناتوره کننده (Urea-PAGE) برای آنالیز RNA و DNA.
• حل کردن (Solubilization) پروتئین‌های نوترکیب نامحلول و اجسام انکلوژن.
• دناتوره کردن پروتئین‌ها برای آنالیز وسترن بلات و الکتروفورز دو بعدی (2D).
• افزایش کارایی هضم آنزیمی پروتئین‌ها.

نکات ایمنی

• ناپایداری: محلول اوره در دمای اتاق به آرامی به سیانات و آمونیاک تجزیه می‌شود (سیانات گروه‌های آمین پروتئین را کاربامیله می‌کند). محلول باید تازه تهیه شده و حرارت داده نشود (بالای ۶۰ درجه).
• برای حذف سیانات: می‌توان از رزین تبادل یونی استفاده کرد.
• نگهداری: در جای خشک و خنک.