نیتروبلو تترازولیوم (NBT) – NITRO B.T., AR GRADE (Nitro Blue Tetrazolium Chloride)

نیتروبلو تترازولیوم (NBT) نمکی زرد رنگ از مشتقات تترازولیوم است که به عنوان یک پذیرنده الکترون و معرف ردوکس در بیولوژی کاربرد دارد. مهم‌ترین کاربرد آن در سیستم‌های آشکارسازی آنزیمی (مانند وسترن بلات و هیبریداسیون درجا) همراه با سوبسترای BCIP است. در این واکنش، آنزیم **آلکالین فسفاتاز (AP)** با حذف گروه فسفات از BCIP، باعث احیای NBT می‌شود. نتیجه این واکنش، تشکیل یک رسوب نامحلول و پایدار به رنگ **آبی تیره تا بنفش (NBT-formazan)** است که محل دقیق پروتئین یا ژن هدف را روی غشا یا بافت نشان می‌دهد.

در فیزیولوژی گیاهی و پزشکی، NBT برای تشخیص تولید **رادیکال‌های سوپراکسید (ROS)** استفاده می‌شود. وقتی بافت گیاهی تحت تنش اکسیداتیو قرار می‌گیرد، رادیکال‌های آزاد تولید شده NBT را احیا کرده و لکه‌های آبی ایجاد می‌کنند (تست هیستوشیمیایی ROS). همچنین در تست عملکرد نوتروفیل‌ها (NBT reduction test) برای تشخیص نقص ایمنی مزمن گرانولوماتوز (CGD) کاربرد دارد.

کاربردها و مصارف

• سیستم آشکارسازی رنگی NBT/BCIP برای آنزیم آلکالین فسفاتاز (AP).
• ردیابی تولید گونه‌های فعال اکسیژن (ROS) و سوپراکسید در بافت گیاهی.
• تشخیص آنزیم‌های دهیدروژناز و اکسیداز در ژل الکتروفورز (Zymography).
• تست انفجار تنفسی (Respiratory Burst) در گلبول‌های سفید.

نکات ایمنی

• حساسیت نوری: بسیار حساس به نور است (باید در تاریکی مطلق نگهداری و استفاده شود).
• سمیت: مضر است.
• نگهداری: در یخچال (۲ تا ۸ درجه).