نیتروبلو تترازولیوم (NBT) گرید مولکولی – NITROBLUE TETRAZOLIUM CHLORIDE (NBT)

نیتروبلو تترازولیوم کلراید (NBT) نمکی زرد رنگ و حساس به نور است که کاربرد دوگانه و مهمی در بیولوژی دارد. ۱. **بیولوژی مولکولی:** به عنوان سوبسترا همراه با BCIP برای آشکارسازی رنگی آنزیم **آلکالین فسفاتاز (AP)** در تکنیک‌های وسترن بلات (Western Blot) و هیبریداسیون درجا (In situ hybridization) استفاده می‌شود. آنزیم AP باعث احیای NBT و تشکیل رسوب نامحلول آبی/بنفش تیره می‌شود که باندها یا سلول‌های هدف را مشخص می‌کند. ۲. **ایمونولوژی:** در “تست NBT” برای بررسی عملکرد گلبول‌های سفید (نوتروفیل‌ها) استفاده می‌شود؛ نوتروفیل‌های فعال در حین فاگوسیتوز رادیکال‌های سوپراکسید تولید می‌کنند (Respiratory Burst) که NBT را احیا کرده و دانه‌های آبی رنگ در سلول ایجاد می‌کند. عدم تشکیل رنگ نشان‌دهنده نقص ایمنی (مانند بیماری CGD) است.

کاربردها و مصارف

• آشکارسازی آنزیم آلکالین فسفاتاز در وسترن بلات و IHC (سیستم NBT/BCIP).
• تست عملکردی نوتروفیل‌ها (NBT reduction test) در تشخیص نقص ایمنی.
• رنگ‌آمیزی هیستوشیمیایی آنزیم‌های دهیدروژناز در بافت.

نکات ایمنی

• حساسیت نوری: به شدت به نور حساس است (باید در فویل و تاریکی نگهداری شود).
• نگهداری: در یخچال (۲-۸ درجه).