نمک‌های محیط کشت M9 مینیمال (5X) (M9 Minimal Medium Salts, 5X)

نمک‌های محیط کشت M9 Minimal (5X) یک محلول استوک بسیار پرکاربرد در آزمایشگاه‌های زیست‌شناسی مولکولی است. این محلول غلیظ، آماده‌سازی محیط کشت M9 را با کاهش تعداد مراحل توزین، ساده و تسریع می‌کند.

اساس عملکرد و نقش اجزاء

محیط M9 یک محیط کشت با ترکیبات کاملاً مشخص (سنتتیک) است که برای رشد E. coli در شرایطی که نیاز به کنترل دقیق ترکیبات محیطی است، به کار می‌رود. این محلول استوک 5X حاوی نمک‌های پایه M9 است: **فسفات سدیم**، **فسفات پتاسیم** و **کلرید سدیم**. برای تهیه محیط نهایی 1X، این محلول استوک باید با آب استریل رقیق شده و با مکمل‌های زیر تکمیل شود:

• یک منبع کربن (معمولاً **گلوکز**)
• یک منبع نیتروژن (معمولاً **کلرید آمونیوم**)
• یون‌های ضروری (مانند **سولفات منیزیم** و **کلرید کلسیم**)

این محیط برای انتخاب سویه‌های اگزوتروف و بیان پروتئین‌های نوترکیب تحت کنترل پروموترهای خاص استفاده می‌شود.

دستورالعمل آماده‌سازی:

برای تهیه ۱ لیتر محیط M9 نهایی، ۲۰۰ میلی‌لیتر از محلول استوک 5X را با آب استریل به حجم نهایی برسانید. سپس محلول‌های استریل مکمل‌ها (گلوکز، کلرید آمونیوم، سولفات منیزیم و کلرید کلسیم) را به آن اضافه کنید.

راهنمای کلی و آموزشی آماده‌سازی محیط‌های کشت

آماده‌سازی صحیح محیط‌های کشت دهیدراته برای دستیابی به نتایج قابل اعتماد در آزمایشگاه میکروبیولوژی ضروری است. مراحل زیر یک راهنمای کلی برای این فرآیند است:

1. توزین دقیق: همواره از ترازوی دقیق برای وزن کردن مقدار پودر مورد نیاز (طبق دستورالعمل روی بسته‌بندی) استفاده کنید.
2. انحلال: پودر وزن‌شده را به حجم مشخصی از آب مقطر یا دیونیزه با کیفیت بالا اضافه کنید. برای انحلال کامل، ظرف را به آرامی تکان داده و در صورت لزوم حرارت دهید تا محلول شفاف شود.
3. استریل‌سازی: محیط آماده شده را با استفاده از اتوکلاو در دمای ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد و فشار ۱۵ پوند بر اینچ مربع به مدت ۱۵ دقیقه استریل کنید (مگر اینکه دستورالعمل خاصی برای محیط ذکر شده باشد که به حرارت حساس است).
4. ریختن در پلیت یا لوله: پس از اتوکلاو، اجازه دهید محیط تا دمای حدود ۴۵-۵۰ درجه سانتی‌گراد خنک شود. سپس در شرایط استریل (زیر هود لامینار) آن را در پلیت‌ها یا لوله‌های استریل توزیع کنید.
5. کنترل کیفی: چند پلیت از هر بچ را به مدت ۲۴ تا ۴۸ ساعت در انکوباتور ۳۵-۳۷ درجه سانتی‌گراد قرار دهید تا از استریل بودن و عدم آلودگی آن‌ها اطمینان حاصل کنید.

خرید و استعلام قیمت:

برای تهیه نمک‌های محیط کشت M9 و سایر محیط‌های زیست‌شناسی مولکولی، اکسیر لایف بهترین انتخاب شماست. ما با ارائه مشاوره تخصصی و تضمین کیفیت، شما را در رسیدن به نتایج دقیق یاری می‌دهیم.