معرف MTT (تیازولیل بلو) – MTT

معرف MTT با نام شیمیایی 3-(4,5-دی‌متیل‌تیازول-2-یل)-2,5-دی‌فنیل‌تترازولیوم بروماید، یک نمک تترازولیوم زرد رنگ و محلول در آب است که استاندارد طلایی جهانی برای سنجش **زنده‌مانی سلولی (Cell Viability)** و تکثیر سلول (Proliferation) محسوب می‌شود. مکانیسم عمل تست MTT بر پایه فعالیت متابولیک سلول‌های زنده استوار است: آنزیم‌های دهیدروژناز میتوکندریایی (مانند سوکسینات دهیدروژناز) در سلول‌های زنده و فعال، حلقه تترازولیوم MTT را شکسته و آن را احیا می‌کنند. این واکنش منجر به تشکیل کریستال‌های نامحلول و بنفش رنگی به نام **فورمازان (Formazan)** می‌شود که در داخل سلول تجمع می‌یابند. سلول‌های مرده یا آسیب‌دیده متابولیسم فعالی ندارند و قادر به انجام این احیا نیستند.

برای خوانش نتایج، کریستال‌های فورمازان باید توسط یک حلال آلی (مانند DMSO یا ایزوپروپانول اسیدی) حل شوند. سپس میزان جذب نوری محلول حاصل در طول موج ۵۷۰ نانومتر با دستگاه اسپکتروفتومتر (ELISA Reader) اندازه‌گیری می‌شود. شدت رنگ بنفش رابطه مستقیم و خطی با تعداد سلول‌های زنده دارد. این تست در کشت بافت گیاهی برای ارزیابی بقای پروتوپلاست‌ها، بررسی اثرات سمی مواد شیمیایی (Cytotoxicity) و غربالگری داروها استفاده می‌شود. MTT به نور حساس است و باید در شرایط استریل و تاریک استفاده شود.

کاربردها و مصارف

• سنجش کمی زنده‌مانی و تکثیر سلول در کشت بافت (MTT Assay).
• ارزیابی سمیت سلولی (Cytotoxicity) داروها و سموم.
• اندازه‌گیری فعالیت متابولیک میتوکندری.
• تست حساسیت دارویی.

نکات ایمنی

• حساسیت نوری: محلول آن به نور حساس است و باید در ظروف تیره یا فویل‌پیچ نگهداری شود.
• سمیت: ماده پودری آن سمی و موتاژن است (با دستکش کار شود).
• نگهداری: در دمای ۲ تا ۸ درجه (یخچال) یا فریزر.