محیط کشت کینگز مدیوم B بیس (King’s Medium B Base)

محیط کشت King’s Medium B Base یا **Pseudomonas Agar F** یک محیط استاندارد برای تشویق تولید رنگدانه فلورسنت **فلورسئین (پیووردین)** توسط گروهی از سودوموناس‌ها (مانند P. aeruginosa, P. fluorescens, P. putida) است.

اساس عملکرد و نقش اجزاء

فرمولاسیون این محیط به گونه‌ای است که تولید پیووردین را به حداکثر و تولید رنگدانه پیوسیانین را به حداقل می‌رساند. این محیط حاوی **پپتون**، **گلیسرول** (به عنوان منبع کربن) و **بافر فسفات** است. غلظت پایین آهن در این محیط، تولید پیووردین را تحریک می‌کند. **سولفات منیزیم** نیز به عنوان کوفاکتور عمل می‌کند. کلنی‌های تولیدکننده پیووردین روی این محیط، زیر نور UV با طول موج کوتاه (254 نانومتر)، **فلورسانس زرد-سبز** درخشانی از خود نشان می‌دهند.

فرمولاسیون (گرم بر لیتر):

دستورالعمل آماده‌سازی:

۳۸ گرم از پودر را در ۱۰۰۰ میلی‌لیتر آب مقطر حاوی ۱۰ میلی‌لیتر گلیسرول حل کنید. حرارت دهید تا به جوش آید و کاملا حل شود. سپس با اتوکلاو در دمای ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل کنید.

راهنمای کلی و آموزشی آماده‌سازی محیط‌های کشت

آماده‌سازی صحیح محیط‌های کشت دهیدراته برای دستیابی به نتایج قابل اعتماد در آزمایشگاه میکروبیولوژی ضروری است. مراحل زیر یک راهنمای کلی برای این فرآیند است:

1. توزین دقیق: همواره از ترازوی دقیق برای وزن کردن مقدار پودر مورد نیاز (طبق دستورالعمل روی بسته‌بندی) استفاده کنید.
2. انحلال: پودر وزن‌شده را به حجم مشخصی از آب مقطر یا دیونیزه با کیفیت بالا اضافه کنید. برای انحلال کامل، ظرف را به آرامی تکان داده و در صورت لزوم حرارت دهید تا محلول شفاف شود.
3. استریل‌سازی: محیط آماده شده را با استفاده از اتوکلاو در دمای ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد و فشار ۱۵ پوند بر اینچ مربع به مدت ۱۵ دقیقه استریل کنید (مگر اینکه دستورالعمل خاصی برای محیط ذکر شده باشد که به حرارت حساس است).
4. ریختن در پلیت یا لوله: پس از اتوکلاو، اجازه دهید محیط تا دمای حدود ۴۵-۵۰ درجه سانتی‌گراد خنک شود. سپس در شرایط استریل (زیر هود لامینار) آن را در پلیت‌ها یا لوله‌های استریل توزیع کنید.
5. کنترل کیفی: چند پلیت از هر بچ را به مدت ۲۴ تا ۴۸ ساعت در انکوباتور ۳۵-۳۷ درجه سانتی‌گراد قرار دهید تا از استریل بودن و عدم آلودگی آن‌ها اطمینان حاصل کنید.

خرید و استعلام قیمت:

برای تهیه محیط کشت King’s Medium B، اکسیر لایف بهترین و مطمئن‌ترین منبع شماست. ما با ارائه مشاوره تخصصی و تضمین اصالت، نیازهای دقیق آزمایشگاه شما را برآورده می‌کنیم.