محیط کشت کلیگلر آیرون آگار (Kligler Iron Agar)

محیط کشت Kligler Iron Agar (KIA) یک محیط تست بیوشیمیایی کلاسیک و بسیار مهم است که در یک لوله شیب‌دار (slant)، اطلاعات زیادی در مورد متابولیسم باکتری‌های گرم منفی فراهم می‌کند.

اساس عملکرد و نقش اجزاء

این محیط سه واکنش را بررسی می‌کند:
۱. **تخمیر گلوکز:** تمام انتروباکتریاسه‌ها **گلوکز** (با غلظت کم، ۰.۱٪) را تخمیر کرده و با تولید اسید، عمق (butt) لوله را **زرد** می‌کنند.
۲. **تخمیر لاکتوز:** باکتری‌های تخمیرکننده **لاکتوز** (با غلظت بالا، ۱٪)، اسید زیادی تولید کرده و علاوه بر عمق، سطح شیب‌دار (slant) را نیز **زرد** می‌کنند. باکتری‌های غیر تخمیرکننده لاکتوز (مانند Salmonella, Shigella) پس از مصرف گلوکز، در سطح شیب‌دار شروع به مصرف پپتون کرده و با تولید ترکیبات قلیایی، سطح را **قرمز** می‌کنند.
۳. **تولید H₂S:** این محیط حاوی **سدیم تیوسولفات** و **فریک آمونیوم سیترات** است. باکتری‌های تولیدکننده H₂S (مانند Salmonella, Proteus) باعث ایجاد رسوب **سیاه رنگ** سولفید آهن در محیط می‌شوند.
**تولید گاز** نیز با ایجاد شکستگی یا حباب در آگار قابل مشاهده است.

فرمولاسیون (گرم بر لیتر):

دستورالعمل آماده‌سازی:

۴۹ گرم از پودر را در ۱۰۰۰ میلی‌لیتر آب مقطر حل کنید. حرارت دهید تا به جوش آید و کاملا حل شود. محلول را در لوله‌ها توزیع کرده و با اتوکلاو در دمای ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل کنید. لوله‌ها را به صورت شیب‌دار با عمق زیاد (long butt) قرار دهید تا جامد شوند.

راهنمای کلی و آموزشی آماده‌سازی محیط‌های کشت

آماده‌سازی صحیح محیط‌های کشت دهیدراته برای دستیابی به نتایج قابل اعتماد در آزمایشگاه میکروبیولوژی ضروری است. مراحل زیر یک راهنمای کلی برای این فرآیند است:

1. توزین دقیق: همواره از ترازوی دقیق برای وزن کردن مقدار پودر مورد نیاز (طبق دستورالعمل روی بسته‌بندی) استفاده کنید.
2. انحلال: پودر وزن‌شده را به حجم مشخصی از آب مقطر یا دیونیزه با کیفیت بالا اضافه کنید. برای انحلال کامل، ظرف را به آرامی تکان داده و در صورت لزوم حرارت دهید تا محلول شفاف شود.
3. استریل‌سازی: محیط آماده شده را با استفاده از اتوکلاو در دمای ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد و فشار ۱۵ پوند بر اینچ مربع به مدت ۱۵ دقیقه استریل کنید (مگر اینکه دستورالعمل خاصی برای محیط ذکر شده باشد که به حرارت حساس است).
4. ریختن در پلیت یا لوله: پس از اتوکلاو، اجازه دهید محیط تا دمای حدود ۴۵-۵۰ درجه سانتی‌گراد خنک شود. سپس در شرایط استریل (زیر هود لامینار) آن را در پلیت‌ها یا لوله‌های استریل توزیع کنید.
5. کنترل کیفی: چند پلیت از هر بچ را به مدت ۲۴ تا ۴۸ ساعت در انکوباتور ۳۵-۳۷ درجه سانتی‌گراد قرار دهید تا از استریل بودن و عدم آلودگی آن‌ها اطمینان حاصل کنید.

خرید و استعلام قیمت:

برای تهیه محیط کشت Kligler Iron Agar، اکسیر لایف بهترین و مطمئن‌ترین منبع شماست. ما با ارائه مشاوره تخصصی، تضمین اصالت کالا و ارسال سریع، خریدی مطمئن را برای شما رقم می‌زنیم.