محیط کشت لوونشتاین-جنسن مدیوم بیس (Löwenstein-Jensen Medium Base)

محیط کشت Löwenstein-Jensen (LJ) Medium Base یک محیط پایه برای تهیه یکی از پرکاربردترین محیط‌های کشت جامد در آزمایشگاه‌های تشخیص سل است. این محیط برای کشت اولیه مایکوباکتریوم‌ها از نمونه‌های استریل و غیر استریل (پس از رفع آلودگی) به کار می‌رود.

اساس عملکرد و نقش اجزاء

این محیط پایه حاوی **نمک‌های معدنی**، **آرد سیب‌زمینی** (منبع کربوهیدرات) و **آسپاراژین** (منبع نیتروژن) است. برای عملکرد کامل، باید با **امولسیون تخم مرغ هموژنیزه** و **گلیسرول** تکمیل شود.
– **غنی‌سازی:** **تخم مرغ** با فرآیند انعقاد (inspissation) جامد شده و منبع غنی از لیپیدها و پروتئین‌های لازم برای رشد مایکوباکتریوم‌ها را فراهم می‌کند.
– **انتخابی بودن:** **مالاکیت گرین (Malachite Green)** که در پایه وجود دارد، رشد اکثر باکتری‌ها و قارچ‌های همراه نمونه را مهار می‌کند.
مایکوباکتریوم‌ها روی این محیط به کندی رشد کرده و پس از چند هفته، کلنی‌های مشخصه (معمولاً کرم رنگ، خشک و خشن شبیه گل کلم برای M. tuberculosis) را تشکیل می‌دهند.

فرمولاسیون (گرم بر لیتر – پایه):

دستورالعمل آماده‌سازی:

پودر پایه را در ۶۰۰ میلی‌لیتر آب مقطر حاوی گلیسرول حل کرده و اتوکلاو نمایید. پس از خنک شدن، ۱۰۰۰ میلی‌لیتر امولسیون تخم مرغ استریل را به صورت اسپتیک به آن اضافه کرده، مخلوط کنید، در لوله‌های استریل توزیع و با فرآیند انعقاد (۸۵ درجه سانتی‌گراد به مدت ۴۵ دقیقه) به صورت شیب‌دار جامد کنید.

راهنمای کلی و آموزشی آماده‌سازی محیط‌های کشت

آماده‌سازی صحیح محیط‌های کشت دهیدراته برای دستیابی به نتایج قابل اعتماد در آزمایشگاه میکروبیولوژی ضروری است. مراحل زیر یک راهنمای کلی برای این فرآیند است:

1. توزین دقیق: همواره از ترازوی دقیق برای وزن کردن مقدار پودر مورد نیاز (طبق دستورالعمل روی بسته‌بندی) استفاده کنید.
2. انحلال: پودر وزن‌شده را به حجم مشخصی از آب مقطر یا دیونیزه با کیفیت بالا اضافه کنید. برای انحلال کامل، ظرف را به آرامی تکان داده و در صورت لزوم حرارت دهید تا محلول شفاف شود.
3. استریل‌سازی: محیط آماده شده را با استفاده از اتوکلاو در دمای ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد و فشار ۱۵ پوند بر اینچ مربع به مدت ۱۵ دقیقه استریل کنید (مگر اینکه دستورالعمل خاصی برای محیط ذکر شده باشد که به حرارت حساس است).
4. ریختن در پلیت یا لوله: پس از اتوکلاو، اجازه دهید محیط تا دمای حدود ۴۵-۵۰ درجه سانتی‌گراد خنک شود. سپس در شرایط استریل (زیر هود لامینار) آن را در پلیت‌ها یا لوله‌های استریل توزیع کنید.
5. کنترل کیفی: چند پلیت از هر بچ را به مدت ۲۴ تا ۴۸ ساعت در انکوباتور ۳۵-۳۷ درجه سانتی‌گراد قرار دهید تا از استریل بودن و عدم آلودگی آن‌ها اطمینان حاصل کنید.

خرید و استعلام قیمت:

برای تهیه L.J. Medium Base و سایر ملزومات کشت مایکوباکتریوم، فروشگاه اکسیر لایف در خدمت شماست. ما با ارائه مشاوره تخصصی، تضمین اصالت کالا و ارسال سریع، خریدی مطمئن را برای شما رقم می‌زنیم.