محیط کشت سیکلوسرین-سفوکسیتین فروکتوز آگار (CCFA)

محیط کشت Cycloserine-Cefoxitin Fructose Agar (CCFA) یک محیط استاندارد برای جداسازی C. difficile، عامل اصلی اسهال و کولیت مرتبط با آنتی‌بیوتیک، است.

اساس عملکرد و نقش اجزاء

این محیط بسیار انتخابی است. دو آنتی‌بیوتیک **سیکلوسرین** و **سفوکسیتین** رشد اکثر فلور میکروبی روده (باکتری‌های گرم منفی و بسیاری از گرم مثبت‌ها و بی‌هوازی‌های دیگر) را مهار می‌کنند. عملکرد افتراقی بر اساس تخمیر **فروکتوز** است. C. difficile فروکتوز را تخمیر کرده و اسید تولید می‌کند. این امر باعث تغییر رنگ شناساگر **نوترال رد** به **زرد** می‌شود. بنابراین، کلنی‌های زرد رنگ با مورفولوژی مشخص (تخت، پخش‌شونده با لبه‌های نامنظم) و بوی ویژه (بوی اصطبل) روی این محیط، به شدت معرف C. difficile هستند.

فرمولاسیون (گرم بر لیتر):

دستورالعمل آماده‌سازی:

۷۴.۱ گرم از پودر پایه را در ۱۰۰۰ میلی‌لیتر آب مقطر حل کنید. حرارت دهید تا به جوش آید و کاملا حل شود. سپس با اتوکلاو در دمای ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل کنید. پس از خنک شدن تا ۴۵-۵۰ درجه، مکمل آنتی‌بیوتیکی (سیکلوسرین و سفوکسیتین) و در برخی فرمولاسیون‌ها، خون اسب را به صورت استریل به آن اضافه کرده و در پلیت‌ها بریزید. محیط باید بلافاصله استفاده شده و در شرایط بی‌هوازی انکوبه شود.

راهنمای کلی و آموزشی آماده‌سازی محیط‌های کشت

آماده‌سازی صحیح محیط‌های کشت دهیدراته برای دستیابی به نتایج قابل اعتماد در آزمایشگاه میکروبیولوژی ضروری است. مراحل زیر یک راهنمای کلی برای این فرآیند است:

1. توزین دقیق: همواره از ترازوی دقیق برای وزن کردن مقدار پودر مورد نیاز (طبق دستورالعمل روی بسته‌بندی) استفاده کنید.
2. انحلال: پودر وزن‌شده را به حجم مشخصی از آب مقطر یا دیونیزه با کیفیت بالا اضافه کنید. برای انحلال کامل، ظرف را به آرامی تکان داده و در صورت لزوم حرارت دهید تا محلول شفاف شود.
3. استریل‌سازی: محیط آماده شده را با استفاده از اتوکلاو در دمای ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد و فشار ۱۵ پوند بر اینچ مربع به مدت ۱۵ دقیقه استریل کنید (مگر اینکه دستورالعمل خاصی برای محیط ذکر شده باشد که به حرارت حساس است).
4. ریختن در پلیت یا لوله: پس از اتوکلاو، اجازه دهید محیط تا دمای حدود ۴۵-۵۰ درجه سانتی‌گراد خنک شود. سپس در شرایط استریل (زیر هود لامینار) آن را در پلیت‌ها یا لوله‌های استریل توزیع کنید.
5. کنترل کیفی: چند پلیت از هر بچ را به مدت ۲۴ تا ۴۸ ساعت در انکوباتور ۳۵-۳۷ درجه سانتی‌گراد قرار دهید تا از استریل بودن و عدم آلودگی آن‌ها اطمینان حاصل کنید.

خرید و استعلام قیمت:

جهت خرید محیط کشت CCFA و مکمل‌های مربوطه، فروشگاه اکسیر لایف در خدمت شماست. ما با ارائه مشاوره تخصصی، تضمین اصالت کالا و ارسال سریع، خریدی مطمئن را برای شما رقم می‌زنیم.