محیط کشت سیترات آگار (Citrate Agar)

محیط کشت Citrate Agar که معمولاً به فرمولاسیون سیمونز (Simmons) اشاره دارد، یک محیط تست بیوشیمیایی کلیدی در شناسایی باکتری‌های گرم منفی است. این تست بخشی از مجموعه تست‌های IMViC (اندول، متیل رد، ووگس-پروسکوئر و سیترات) است.

اساس عملکرد و نقش اجزاء

این محیط حاوی سدیم سیترات به عنوان تنها منبع کربن و آمونیوم فسفات به عنوان تنها منبع نیتروژن است. باکتری‌هایی که آنزیم سیترات پرمئاز را دارند، می‌توانند سیترات را به داخل سلول منتقل کرده و آن را متابولیزه کنند. در این فرآیند، آن‌ها از نمک آمونیوم استفاده کرده و محصولات قلیایی تولید می‌کنند که pH محیط را افزایش می‌دهد. این افزایش pH توسط شناساگر **بروموتیمول بلو (Bromothymol Blue)** تشخیص داده شده و باعث تغییر رنگ محیط از سبز به **آبی پروس** می‌شود. تغییر رنگ به آبی نشان‌دهنده واکنش مثبت است.

فرمولاسیون (گرم بر لیتر):

دستورالعمل آماده‌سازی:

۲۴.۲ گرم از پودر را در ۱۰۰۰ میلی‌لیتر آب مقطر حل کنید. حرارت دهید تا به جوش آید و کاملا حل شود. محلول را در لوله‌ها توزیع کرده و با اتوکلاو در دمای ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل کنید. لوله‌ها را به صورت شیب‌دار (Slant) با عمق زیاد قرار دهید تا جامد شوند.

راهنمای کلی و آموزشی آماده‌سازی محیط‌های کشت

آماده‌سازی صحیح محیط‌های کشت دهیدراته برای دستیابی به نتایج قابل اعتماد در آزمایشگاه میکروبیولوژی ضروری است. مراحل زیر یک راهنمای کلی برای این فرآیند است:

1. توزین دقیق: همواره از ترازوی دقیق برای وزن کردن مقدار پودر مورد نیاز (طبق دستورالعمل روی بسته‌بندی) استفاده کنید.
2. انحلال: پودر وزن‌شده را به حجم مشخصی از آب مقطر یا دیونیزه با کیفیت بالا اضافه کنید. برای انحلال کامل، ظرف را به آرامی تکان داده و در صورت لزوم حرارت دهید تا محلول شفاف شود.
3. استریل‌سازی: محیط آماده شده را با استفاده از اتوکلاو در دمای ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد و فشار ۱۵ پوند بر اینچ مربع به مدت ۱۵ دقیقه استریل کنید (مگر اینکه دستورالعمل خاصی برای محیط ذکر شده باشد که به حرارت حساس است).
4. ریختن در پلیت یا لوله: پس از اتوکلاو، اجازه دهید محیط تا دمای حدود ۴۵-۵۰ درجه سانتی‌گراد خنک شود. سپس در شرایط استریل (زیر هود لامینار) آن را در پلیت‌ها یا لوله‌های استریل توزیع کنید.
5. کنترل کیفی: چند پلیت از هر بچ را به مدت ۲۴ تا ۴۸ ساعت در انکوباتور ۳۵-۳۷ درجه سانتی‌گراد قرار دهید تا از استریل بودن و عدم آلودگی آن‌ها اطمینان حاصل کنید.

خرید و استعلام قیمت:

برای تهیه محیط کشت Simmons Citrate Agar، فروشگاه اکسیر لایف در خدمت شماست. ما با ارائه مشاوره تخصصی، تضمین اصالت کالا و ارسال سریع، خریدی مطمئن را برای شما رقم می‌زنیم.