محیط کشت دمی فریزر براث (Demi Fraser Broth)

محیط کشت Demi Fraser Broth یا **فریزر براث نیمه غلظت**، مرحله دوم در پروتکل استاندارد ISO 11290 برای جداسازی Listeria است. نمونه ابتدا در فریزر براث اولیه (با غلظت کامل عوامل انتخابی) غنی‌سازی شده و سپس برای افزایش بازیابی، به این محیط با قدرت انتخابی کمتر منتقل می‌شود.

اساس عملکرد و نقش اجزاء

این محیط یک بستر غنی شامل پپتون‌ها و عصاره‌ها است. عملکرد افتراقی آن بر اساس توانایی لیستریا در هیدرولیز **اسکولین** به اسکولیتین است. اسکولیتین با **فریک آمونیوم سیترات** واکنش داده و باعث **سیاه شدن** محیط می‌شود. انتخابی بودن محیط به دلیل حضور **نالیدیکسیک اسید** (برای مهار گرم منفی‌ها) و **آکریفلاوین** (برای مهار گرم مثبت‌های دیگر) است. غلظت این عوامل انتخابی در دمی-فریزر نصف فریزر براث کامل است، که به سلول‌های لیستریا که ممکن است در مرحله اول تحت استرس قرار گرفته باشند، اجازه رشد بهتری می‌دهد.

فرمولاسیون (گرم بر لیتر):

دستورالعمل آماده‌سازی:

۵۷.۳ گرم از پودر پایه را در ۱۰۰۰ میلی‌لیتر آب مقطر حل کرده و اتوکلاو نمایید. پس از خنک شدن، مکمل فریزر (حاوی نالیدیکسیک اسید و آکریفلاوین با نیمه غلظت) را به صورت استریل به آن اضافه کنید.

راهنمای کلی و آموزشی آماده‌سازی محیط‌های کشت

آماده‌سازی صحیح محیط‌های کشت دهیدراته برای دستیابی به نتایج قابل اعتماد در آزمایشگاه میکروبیولوژی ضروری است. مراحل زیر یک راهنمای کلی برای این فرآیند است:

1. توزین دقیق: همواره از ترازوی دقیق برای وزن کردن مقدار پودر مورد نیاز (طبق دستورالعمل روی بسته‌بندی) استفاده کنید.
2. انحلال: پودر وزن‌شده را به حجم مشخصی از آب مقطر یا دیونیزه با کیفیت بالا اضافه کنید. برای انحلال کامل، ظرف را به آرامی تکان داده و در صورت لزوم حرارت دهید تا محلول شفاف شود.
3. استریل‌سازی: محیط آماده شده را با استفاده از اتوکلاو در دمای ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد و فشار ۱۵ پوند بر اینچ مربع به مدت ۱۵ دقیقه استریل کنید (مگر اینکه دستورالعمل خاصی برای محیط ذکر شده باشد که به حرارت حساس است).
4. ریختن در پلیت یا لوله: پس از اتوکلاو، اجازه دهید محیط تا دمای حدود ۴۵-۵۰ درجه سانتی‌گراد خنک شود. سپس در شرایط استریل (زیر هود لامینار) آن را در پلیت‌ها یا لوله‌های استریل توزیع کنید.
5. کنترل کیفی: چند پلیت از هر بچ را به مدت ۲۴ تا ۴۸ ساعت در انکوباتور ۳۵-۳۷ درجه سانتی‌گراد قرار دهید تا از استریل بودن و عدم آلودگی آن‌ها اطمینان حاصل کنید.

خرید و استعلام قیمت:

برای تهیه محیط کشت Demi Fraser Broth و مکمل‌های آن، اکسیر لایف بهترین انتخاب شماست. ما با ارائه مشاوره تخصصی و تضمین کیفیت، شما را در رسیدن به نتایج دقیق یاری می‌دهیم.